Lančana reakcija polimeraze (PCR) je kamen temeljačka tehnika u molekularnom biologiji, omogućavajući pojačavanje specifičnih DNK segmenata za različite aplikacije kao što su genski kloniranje, genetsko testiranje i dijagnozu bolesti. Kvaliteta vode koja se koristi u PCR-u je kritična kao što kontaminanti mogu inhibirati reakciju ili uvesti lažne rezultate. Kao dobavljač laboratorija EDI (elektrodeonizacija) vodenih sistema, često se pitam da li se naši sistemi mogu koristiti za PCR. U ovom blogu istražit ću zahtjeve za vodom PCR-a, mogućnostima naših laboratorijskih edi vodenih sistema i prikladnost naših proizvoda za PCR aplikacije.
Zahtjevi za PCR-klasu vode
PCR reakcije su vrlo osjetljive na onečišćene kontaminante prisutne u vodi. Čak ni u tragovima nečistoća može imati značajan utjecaj na efikasnost i tačnost reakcije. Slijedi ključni zahtjevi za PCR-kladu vode:
Nizak jonski sadržaj
Ioni kao što su natrijum, kalijum, kalcijum i magnezijum mogu ometati PCR reakciju utjecajući na aktivnost enzima DNK polimeraze. Visoka jonska čvrstoća može uzrokovati i određeno vezivanje temeljnih pripravnika i DNK predložaka, što dovodi do lažnih proizvoda za pojačavanje. Stoga, voda PCR-a trebala bi imati nizak jonski sadržaj, obično s otporom od najmanje 18,2 Mω · cm.
Niski organski sadržaj
Organski kontaminanti poput proteina, nukleinskih kiselina i ugljikohidrata mogu inhibirati PCR reakciju obvezujući se na enzim DNK polimeraze ili se takmiče s prajmerima za obvezujući predložak DNK. PCR-kladna voda treba imati nizak organski sadržaj, obično s ukupnim organskim ugljenom (TOC) manjim od 5 ppb.
Nizak endotoksinski i nukleazni nivoi
Endotoksini su lipopolitičari koji se nalaze u ćelijskim zidovima gram-negativnih bakterija. Oni mogu prouzrokovati upalu i imunološke odgovore u živim organizmima i mogu se miješati i u PCR reakciju inhibiranjem enzima DNK polimeraze. Enzimi nuklease mogu degradirati DNK predložak i prajmere, što dovodi do gubitka efikasnosti pojačanja. PCR-kladna voda treba imati nizak endotoksinski i nukleazni nivoi, obično sa manje od 0,03 EU / ml endotoksina i neodređenog nivoa nukleana.
Mogućnosti laboratorija EDI vodovoda
EDI je kontinuirani proces pročišćavanja vode bez hemijskog kvaliteta koji kombinira razmjenu jona i elektrodijsku za uklanjanje jona iz vode. Naši laboratorijski EDI vodeni sustavi dizajnirani su za proizvodnju visokokvalitetne vode koja ispunjava stroge zahtjeve različitih laboratorijskih aplikacija, uključujući PCR. Evo nekih ključnih karakteristika i mogućnosti naših laboratorijskih edi vodenih sistema:
Visoka otpornost
Naši laboratorijski EDI vodeni sustavi mogu proizvesti vodu s otporom do 18,2 Mω · CM, koji ispunjava uslov za nizak ionski sadržaj u PCR-okom. Visoka otpornost se postiže kombinacijom ionskih dimolija i elektrodijskih membrana, koji iz vode uklone ioni na vrlo nizak nivo.
Niski organski sadržaj
Pored uklanjanja iona, naši laboratorijski sustavi za vodu opremljeni su i aktivnim filtrima ugljika i ultrafiltracijskim membranama za uklanjanje organskih kontaminanata iz vode. Ti filteri mogu učinkovito ukloniti proteine, nukleinske kiseline i ugljikohidrate, osiguravajući da voda ima nizak organski sadržaj. TOC vodene vode proizvedene našim laboratorijskim EDI vodovodnim sistemima obično je manji od 5 PPB-a, koji ispunjava zahtjev za vodom PCR-a.
Nizak endotoksinski i nukleazni nivoi
Naši laboratorijski EDI vodeni sustavi dizajnirani su tako da minimiziraju prisustvo endotoksina i nukleasta u vodi. Voda se prolazi kroz niz filtera i membrana koji uklanjaju bakterije i druge mikroorganizme, smanjujući rizik od kontaminacije endotoksina. Pored toga, voda se tretira ultraljubičastom svjetlošću kako bi inaktivirala preostale mikroorganizme i nukleaste. Endotoksin i nukleaseni nivoi vode proizvedene našim laboratorijskim vodama za vodu obično su vrlo niski, ispunjavajući zahtjeve za vodom PCR-a.
Prikladnost naših laboratorijskih edi vodenih sistema za PCR
Na osnovu zahtjeva za PCR-stupanj vode i mogućnosti naših laboratorijskih EDI vodovoda, mogu samouvjereno reći da su naši sistemi pogodni za PCR aplikacije. Evo nekih od razloga zašto:
Visokokvalitetna proizvodnja vode
Naši laboratorijski EDI vodeni sustavi dizajnirani su za proizvodnju visokokvalitetne vode koja ispunjava stroge zahtjeve PCR-a. Voda ima nizak jonski sadržaj, nizak organski sadržaj i nizak endotoksinski i nukleazni nivoi, osiguravajući da se neće ometati na PCR reakciju ili uvesti lažne rezultate.
Dosljednost i pouzdanost
Naši laboratorijski EDI vodeni sustavi izgrađeni su visokokvalitetnim komponentama i naprednom tehnologijom, osiguravajući konzistentnu i pouzdanu proizvodnju vode. Sistemi su opremljeni senzorima i kontrolerima koji prate kvalitet vode u realnom vremenu i prilagođavaju postupak pročišćavanja prema potrebi za održavanje željenog kvaliteta vode. To osigurava da je voda proizvedena od strane naših sustava uvijek najviše kvalitete, pružajući pouzdane rezultate u PCR aplikacijama.
Prilagodljivi rješenja
Razumijemo da različite laboratorije imaju različite zahtjeve za kvalitetom i volumen vode. Zato nudimo niz laboratorijskih vodenih vodovoda koji bi udovoljili specifičnim potrebama naših kupaca. NašSrednjorovijski serija Deionizirani vodovodPogodan je za srednje laboratorije sa umjerenim potražnjom vode, dok je našaBasic-Q serija Deionizirani vodovodIdealan je za male laboratorije sa ograničenim prostorom i budžetom. Za velike laboratorije sa visokom potražnjom vode, nudimo našuMaster-Q serija Deionizirani vodovod, koji može proizvesti do 100 litara visokokvalitetne vode na sat.
Zaključak
Zaključno, naši laboratorijski EDI vodeni sustavi pogodni su za PCR aplikacije. Oni su sposobni da proizvode visokokvalitetnu vodu koja ispunjava stroge zahtjeve vodene klase, uključujući nizak jonski sadržaj, nizak organski sadržaj i nizak endotoksinski i nukleazni nivoi. Sistemi su također dosljedni, pouzdani i prilagodljivi, pružajući isplativo rješenje za laboratorije svih veličina.
Ako ste zainteresirani za učenje više o našim laboratorijskim EDI vodovodnim sistemima ili želite razgovarati o vašim specifičnim potrebama za pročišćavanje vode, kontaktirajte nas. Naš tim stručnjaka rado će vam pomoći da pronađete pravo rješenje za vašu laboratoriju.
Reference
- Sambrook, J. i Russell, DW (2001). Molekularna klonizacija: laboratorijski priručnik. Hladna proljetna luka laboratorija.
- INNIS, MA, Gelfand, DH, Sninsky, JJ, & White, TJ (ur.). (1990). PCR protokoli: vodič za metode i aplikacije. Akademska štampa.
- Watson, JD, & Crick, FHC (1953). Molekularna struktura nukleinskih kiselina; Struktura za nukleinsku kiselinu deoksirizoza. Priroda, 171 (4356), 737-738.
